搅拌式多肽合成仪操作流程

　　搅拌式多肽合成仪是一种基于固相多肽合成法(SPPS)的自动化设备，通过程序控制实现氨基酸的逐个偶联、脱保护、洗涤等步骤，最终合成目标多肽链。
 

　　搅拌式多肽合成仪操作流程：
 

　　准备阶段：
 

　　环境要求：选择干燥、清洁、温度稳定的场所(20℃±5℃)，避免潮湿、高温或灰尘干扰。
 

　　设备检查：确保仪器安装平稳，电源电压、频率与设备要求匹配(如压缩空气压力“AIR”表需60-100psi，“N₂”表需5-10psi)。检查溶剂储液瓶、气体管道连接是否紧密，防止泄漏。
 

　　试剂准备：准备高纯度氨基酸、活化试剂(如HBTU)、溶剂(DMF、DCM)及树脂，确保无杂质。根据合成方案称量试剂，严格按比例混合(如3倍过量氨基酸用于偶联反应)。
 

　　树脂处理：将树脂加入反应器，用DCM溶胀后抽干，再用DMF洗涤去除杂质。
 

　　合成阶段：
 

　　输入序列与参数：输入多肽序列，设定反应条件(温度、时间、溶剂比例)。示例：Fmoc脱保护(20%哌啶/DMF，5分钟×2次)；偶联反应(3倍过量氨基酸，1小时)。
 

　　启动程序：运行设备自检程序，校准温度、压力、取液针等参数，确保传感器精度。打开合成仪电源及压缩空气开关，启动预设程序。
 

　　自动合成：仪器自动完成脱保护、偶联、洗涤循环，全程监测反应温度、压力及pH值。
 

　　后处理阶段：
 

　　裂解：加入裂解液(如TFA/水/三异丙基硅烷=95:2.5:2.5)，室温搅拌2小时，将多肽从树脂上裂解下来。
 

　　纯化：过滤除去树脂，浓缩裂解液后用乙*沉淀粗肽，通过离心、洗涤得到固体产物。使用HPLC纯化，去除杂质。