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对于多肽的一些常用的使用知识看完便知
点击次数:119 发布时间:2021-11-04
  对于多肽的一些常用的使用知识,对此类信息感兴趣的可千万不要错过了,话不多说下面让我们一起来了解一下吧。
 
  1、保存
 
  大多数多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前,冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,方法是以小的工作样量存放。
 
  对于含Cys,MetorTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解不可少,因为这种多肽可易空气氧化,在封瓶前,慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比,生命期有限。
 
  2、溶解性
 
  大多肽的道选溶剂是超纯抽气水。稀乙酸或氨水分别对于碱性或酸性多肽的溶解很重要。这些方法不溶的多肽,需要DMF、脲、guanidiniamchloride或acetonitnle来溶解,这些溶剂可能某些实验有副作用。所以我们建议设计多肽时要加注意。
 
  残基Ala,Cys,Ile,Leu,Met,Phe和Val将全增加多肽的溶解难度。
 
  3、保存操作
 
  包装1mg或更少的多肽按净重包装,声明的小瓶重不含相关抗离子和水。例如,氨基酸分析决定的肽含量是80%,在1mg样品中,那么瓶中毛重是1.25mg。
 
  大量的多肽以毛重算。标出的重量含相关抗离子和水,例如,25mg样品中肽百分比为90%,那么,实际肽量为25mg×90%=22.5mg
 
  不要把肽含量和纯度搞混了。肽的纯度可能是100%,而肽含量相关带电基团(如Arg,Lys)的抗离子量和肽新水性决定。这是合成肽的本身特性。
 
  4、冻干肽的保存
 
  所有产品应存于冰箱,最好为-20℃。多数肽以此方法可以存放几年不变。
 
  5、肽溶液的保存
 
  溶液肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性pH(pH5-7),-20℃保存的,为避免样品的反复冻融,最好分成小样存放。一份样品融冻后未用完,应扔掉,细菌降解有时会成为溶液肽的麻烦,为克服此,肽应溶于无菌水,或肽溶液用0.2μM滤膜过滤。
 
  6、多肽的重建和操作
 
  多数肽溶于无菌蒸溜水。初次溶解时,要注意使初始浓度比要求浓度大,如果多肽仅有限溶解性,这便允许加入其它溶解剂或缓冲盐。
 
  如果多肽在水中的溶解性有限,有几种选择可帮助溶解:
 
  对碱性肽用稀乙酸(含Arg,Lys,His)
 
  酸性肽用稀氨水(含Asp,Glu)
 
  对极疏水的肽用10%有机修饰物(Acetonitnile,Methanol)
 
  极不溶的肽用DM50或DMF
 
  guaniclinehydrochloride或脲的浓溶液也很有用,与上述方法合用,声处理也是溶解多肽的有效手段。

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